病理切片廠家開課啦！我們說說制作病理切片過程中的固定和水洗，廢話不多說讓我們開始吧！

      固定是技術(shù)室工作的第一步，也是在整個制片過程中無法補救的一步。所謂“固定”，就是組織離體后，用各種辦法使其細胞內(nèi)的物質(zhì)盡量接近其生活狀態(tài)時的形態(tài)結(jié)構(gòu)和位置的過程。固定的目的是為了防止組織細胞自溶與腐敗，防止了細胞內(nèi)的酶對蛋白質(zhì)的分解作用，使細胞內(nèi)的各和成分如蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物或酶類轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄晕镔|(zhì)，以保持原有的結(jié)構(gòu)與生活時相仿。

      另外，組織固定后，均呈一定的硬化狀態(tài)，增加組織韌性，而且不易變形，有利于以后的組織處理。所以組織一旦離體必需及時固定，固定液的量應為組織的5倍。固定的關(guān)鍵主要與固定的及時性、固定液的選擇、固定液的濃度、固定的溫度和時間有關(guān)。最常用的固定液為10％福爾馬林。筆者認為，10％福爾馬林由于受到福爾馬林的質(zhì)量、使用時的揮發(fā)和取材時帶入的水分影響，濃度被降低致組織固定不足，而高濃度的福爾馬林，降低了對組織的穿透性，形成周圍固定好而中央固定不到的現(xiàn)象。通過實踐，本人認為以酸性12～15％的福爾馬林最佳。大標本（2cm厚）一般需要6～12個小時，小標本一般需要3～6個小時；當室溫低18℃時，可在37℃以下的溫箱內(nèi)加溫4～6個小時。由于HE染色最佳著色PH為3.5～4.5,?中性福爾馬林對蘇木素染色有一定影響,細胞核容易發(fā)灰,核染色質(zhì)不佳。所以,?盡管中性福爾馬林對抗原有很好的保存作用，但酸性福爾馬林對絕大多數(shù)抗原來說也有很好的保存作用，所以在沒有特別處理的情況下常規(guī)HE用12～15％酸性福爾馬林也可以（每100毫升12～15％福爾馬林液內(nèi)加5毫升冰醋酸）。骨髓、結(jié)締組織固定以Bouin液為佳，經(jīng)Bouin液固定后的組織必須流水沖洗4小時以上。有條件的單位可根據(jù)不同要求選用二種或二種以上的固定液；少數(shù)單位還可建立組織冷凍庫，以便適應各種特殊的處理要求。

      固定后水洗（10～20分鐘），通常被很多人所忽視，而水洗不徹底，容易造成脫片和染色不鮮艷。對需做免疫組織化學的組織，更不應當忽視。福爾馬林不利于組織塊內(nèi)抗原的保存。

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